Real Time PCR ile Kantitatif Analiz
B erna Türkmen - Moleküler Biyoloji ve Genetik, Haliç Üniversitesi Real-time PCR, ışıma özelliğine sahip olan moleküllerin kullanılması ile PCR çalışma aşamasında izlenmesi ve miktar belirlenmesi yöntemidir. Real-time PCR, tek bir tüp kullanılarak DNA’nın çoğaltılmasını ve ürünlerini bir arada tutmayı kılar. Bu gelişme ile birlikte gen kopyası gerçekleştiğinde oluşan ürünlerin düzeylerini sayısal olarak bir değere dönüştürme sağlanmıştır. Bunun yanında Real-time PCR ile PCR çalışması devam ederken ekranda eşzamanlı izlemek ve PCR döngülerinin sayısına müdahale etmek mümkünleşmiştir. Real-time PCR yapılırken kopya oluşmasını görünür hale getirmek için floresan işaretli problar ve boyalar kullanılır. Bu floresan ile DNA’nın oluşumu arasında bir doğru orantı vardır. Real-time PCR; gen ekspresyon analizlerinde, hastalık teşhisinde, gıda testlerinde GDO miktar tayini gibi alanlarda kullanılmaktadır. Real-time PCR ile amplifikasyon sonucu ürün varlığı 2 genel yöntem ile te